担当区分：筆頭著者   記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Public Library of Science (PLoS)  

Myogenic stem cells are a promising avenue for the treatment of muscular disorders. Freshly isolated muscle stem cells have a remarkable engraftment ability in vivo, but their cell number is limited. Current conventional culture conditions do not allow muscle stem cells to expand in vitro with their bona fide engraftment efficiency, requiring the improvement of culture procedures for achieving successful cell-therapy for muscle disorders. Here we expanded mouse muscle stem cells and human myoblasts with Notch ligands, DLL1, DLL4, and JAG1 to activate Notch signaling in vitro and to investigate whether these cells could retain their engraftment efficiency. Notch signaling promotes the expansion of Pax7+MyoD- mouse muscle stem-like cells and inhibits differentiation even after passage in vitro. Treatment with Notch ligands induced the Notch target genes and generated PAX7+MYOD- stem-like cells from human myoblasts previously cultured on conventional culture plates. However, cells treated with Notch ligands exhibit a stem cell-like state in culture, yet their regenerative ability was less than that of freshly isolated cells in vivo and was comparable to that of the control. These unexpected findings suggest that artificial maintenance of Notch signaling alone is insufficient for improving regenerative capacity of mouse and human donor-muscle cells and suggest that combinatorial events are critical to achieve muscle stem cell and myoblast engraftment potential.

添付ファイル： file-2.pdf

DOI： 10.1371/journal.pone.0177516

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担当区分：筆頭著者   記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Public Library of Science (PLoS)  

添付ファイル： Sakai_Sehara-Fujisawa_2013.pdf

DOI： 10.1371/journal.pone.0063016

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）  

Androgen is widely acknowledged to regulate skeletal muscle mass, however, the specific mechanism driving muscle atrophy resulting from androgen deficiency remains elusive. Systemic androgen receptor knockout (ARKO) mice exhibit reduction in both muscle strength and muscle mass while skeletal muscle fiber specific ARKO mice have decreased muscle strength without affecting skeletal muscle mass in the limbs. Therefore, androgens may indirectly regulate skeletal muscle mass through effects on non-myofibers. Considering this, we investigated focusing on blood fluid factors that might play a role in the regulation of skeletal muscle mass under the influence of androgens. Using male mice model of sham, orchidectomy and DHT replacement, mass spectrometry for serum samples of each group identified epidermal growth factor receptor (EGFR) as a candidate protein involving the regulation of skeletal muscle mass affected by androgens. Egfr expression in both liver and epididymal white adipose tissue correlated with androgen levels. Furthermore, Egfr expression in these tissues was predominantly elevated in male compared to female mice. Interestingly, male mice exhibited significantly elevated serum EGFR concentrations compared to their female counterparts, suggesting a connection with androgen levels. Treatment of EGFR to C2C12 cells promoted phosphorylation of AKT and its downstream S6K, and enhanced the protein synthesis in vitro. Furthermore, the administration of EGFR to female mice revealed a potential role in promoting an increase in skeletal muscle mass. These findings collectively enhance our understanding of the complex interplay among androgens, EGFR, and the regulation of skeletal muscle mass.

DOI： 10.1507/endocrj.EJ24-0410

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掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Elsevier BV  

DOI： 10.1016/j.isci.2021.102303

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Wiley  

DOI： 10.1002/rco2.28

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その他リンク： https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full-xml/10.1002/rco2.28

記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Elsevier BV  

Epigenetic transcriptional regulation is essential for the differentiation of various types of cells, including skeletal muscle cells. DNA methyltransferase 1 (Dnmt1) is responsible for maintenance of DNA methylation patterns via cell division. Here, we investigated the relationship between Dnmt1 and skeletal muscle regeneration. We found that Dnmt1 is upregulated in muscles during regeneration. To assess the role of Dnmt1 in satellite cells during regeneration, we performed conditional knockout (cKO) of Dnmt1 specifically in skeletal muscle satellite cells using Pax7CreERT2 mice and Dnmt1 flox mice. Muscle weight and the cross-sectional area after injury were significantly lower in Dnmt1 cKO mice than in control mice. RNA sequencing analysis revealed upregulation of genes involved in cell adhesion and apoptosis in satellite cells from cKO mice. Moreover, satellite cells cultured from cKO mice exhibited a reduced number of cells. These results suggest that Dnmt1 is an essential factor for muscle regeneration and is involved in positive regulation of satellite cell number.

DOI： 10.1016/j.bbrc.2020.11.116

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：The Company of Biologists  

Pax7 expression marks stem cells in developing skeletal muscles and adult satellite cells during homeostasis and muscle regeneration. The genetic determinants that control the entrance into the myogenic program and the appearance of PAX7+ cells during embryogenesis are poorly understood. SIX homeoproteins are encoded by the Sine oculis homeobox related Six1-Six6 genes in vertebrates. Six1, Six2, Six4 and Six5 are expressed in the muscle lineage. Here we tested the hypothesis that Six1 and Six4 could participate in the genesis of myogenic stem cells. We show that fewer PAX7+ cells occupy a satellite cell position between the myofiber and its associated basal lamina in Six1 and Six4 (s1s4KO) at E18. However, PAX7+ cells are detected in remaining muscle masses present in the epaxial region of the double mutant embryos and are able to divide and contribute to muscle growth. To further characterize the properties of s1s4KO PAX7+ cells, we analyzed their transcriptome and tested their properties after transplantation in adult regenerating tibialis anterior (TA) muscle. Mutant stem cells form hypotrophic myofibers that are not innervated but retain the ability to self-renew.

DOI： 10.1242/dev.185975

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その他リンク： http://journals.biologists.com/dev/article-pdf/doi/10.1242/dev.185975/1968029/dev185975.pdf

記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Elsevier BV  

DOI： 10.1016/j.molcel.2019.02.026

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Elsevier BV  

DOI： 10.1016/j.stemcr.2019.01.007

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Springer Science and Business Media LLC  

DOI： 10.1186/s13287-017-0556-8

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記述言語：英語   掲載種別：論文集(書籍)内論文   出版者・発行元：Springer New York  

DOI： 10.1007/978-1-4939-6771-1_2

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Elsevier BV  

DOI： 10.1016/j.stem.2016.11.020

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Springer Science and Business Media LLC  

DOI： 10.15252/embj.201489923

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その他リンク： https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full-xml/10.15252/embj.201489923

記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Elsevier BV  

DOI： 10.1016/j.mod.2014.12.001

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記述言語：英語   掲載種別：研究論文（学術雑誌）   出版者・発行元：Public Library of Science (PLoS)  

DOI： 10.1371/journal.pone.0047078

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開催年月日： 2024年11月

記述言語：日本語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：福岡   国名：日本国  

アンドロゲンは、リガンド依存性核内受容体であるアンドロゲン受容体(AR)に結合する ことにより、その作用の大部分を発揮する。アンドロゲンは骨格筋に対して同化作用を持 つが、以前の研究では、骨格筋細胞の AR は、骨格筋の筋量よりも、骨格筋の質を調節す ると報告されている。したがって、アンドロゲンの骨格筋の量への作用は、骨格筋細胞以 外の細胞を介して発揮されることになる。このような背景から、骨格筋の恒常性維持に重 要な役割を果たす間葉系前駆細胞における AR の細胞的および分子的メカニズムは、ほと んど未知のままである。本研究では、間葉系前駆細胞における AR の発現を証明し、間葉 系前駆細胞において AR を欠損させると、成熟成体マウスの四肢筋量が減少することを見 出した。間葉系前駆細胞における AR の欠損は、細胞死や細胞外マトリックスの構成に関 連する転写産物の異常な制御により、年齢に関係なく、顕著な会陰筋の筋萎縮を引き起こ した。さらに、間葉系前駆細胞における AR が、インスリン様成長因子 1(IGF1)の発現を 制御すること、および IGF1 の投与が、パラクリン様式で会陰筋の萎縮を防ぐことを明らか にした。これらの知見は、アンドロゲンの同化作用が、少なくとも部分的には間葉系前駆 細胞における AR シグナル伝達を介して骨格筋量を調節していることを示している。

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開催年月日： 2024年11月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Matsuyama   国名：日本国  

Androgens exert their effects primarily by binding to the androgen receptor (AR), a ligand-dependent nuclear receptor. While androgens have anabolic effects on skeletal muscle, previous studies reported that AR functions in myofibers to regulate skeletal muscle quality, rather than skeletal muscle mass. Therefore, the anabolic effects of androgens are exerted via nonmyofiber cells. In this context, the cellular and molecular mechanisms of AR in mesenchymal progenitors, which play a crucial role in maintaining skeletal muscle homeostasis, remain largely unknown. In this study, we demonstrated expression of AR in mesenchymal progenitors and found that targeted AR ablation in mesenchymal progenitors reduced limb muscle mass in mature adult, but not young or aged, male mice, although fatty infiltration of muscle was not affected. The absence of AR in mesenchymal progenitors led to remarkable perineal muscle hypotrophy, regardless of age, due to abnormal regulation of transcripts associated with cell death and extracellular matrix organization. Additionally, we revealed that AR in mesenchymal progenitors regulates the expression of insulin-like growth factor 1 (Igf1) and that IGF1 administration prevents perineal muscle atrophy in a paracrine manner. These findings indicate that the anabolic effects of androgens regulate skeletal muscle mass via, at least in part, AR signaling in mesenchymal progenitors.

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開催年月日： 2024年9月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：Nara   国名：日本国  

Androgens exert their effects primarily by binding to the androgen receptor (AR), a ligand-dependent nuclear receptor. While androgens have anabolic effects on skeletal muscle, previous studies reported that AR functions in myofibers to regulate skeletal muscle quality, rather than skeletal muscle mass. Therefore, the anabolic effects of androgens are exerted via extra-myofiber cells or tissues. In this context, the cellular and molecular mechanisms of AR in mesenchymal progenitors, which play a crucial role in maintaining skeletal muscle homeostasis, remain largely unknown. In this study, we demonstrated expression of AR in mesenchymal progenitors and found that targeted AR ablation in mesenchymal progenitors reduced limb muscle mass in mature adult, but not young or aged, male mice, although fatty infiltration of muscle was not affected. The absence of AR in mesenchymal progenitors led to remarkable perineal muscle hypotrophy, regardless of age, due to abnormal regulation of transcripts associated with apoptosis and extracellular matrix organization. Additionally, we revealed that AR in mesenchymal progenitors regulates the expression of insulin-like growth factor 1, which can increase skeletal muscle mass in a paracrine manner. These findings indicate that the anabolic effects of androgens regulate skeletal muscle mass via, at least in part, AR signaling in mesenchymal progenitors.

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開催年月日： 2024年6月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Florida   国名：アメリカ合衆国  

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開催年月日： 2024年5月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：東京   国名：日本国  

【目的】アンドロゲンは、核内受容体であるアンドロゲン受容体 (androgen receptor, AR) と結合し、転写因子として働くことで、そのほとんどの機能を発揮する。しかしながら、定常状態の骨格筋組織維持に必須である間葉系前駆細胞におけるARを介する機能については、明らかにできていない。本研究の目的は、骨格筋間葉系前駆細胞でのアンドロゲン標的遺伝子を同定し、その機能から骨格筋組織でのアンドロゲン作用の分子メカニズムを明らかにすることである。【方法】間葉系前駆細胞特異的にARを欠損させる遺伝子改変マウスを作成し、RNA-seqならびにCUT&RUNにより、ARの機能ならびにその標的遺伝子を探索した。【結果】間葉系前駆細胞特異的AR欠損オスマウスにおいて、四肢の筋肉量が減少することを見出した。さらにRNA-seqの結果から、間葉系前駆細胞におけるARの欠損は、アポトーシスとタンパク質分解に関連する転写産物の異常制御を引き起こすことを見出した。加えて、CUT&RUNの結果から、間葉系前駆細胞におけるARは、インスリン様成長因子1の発現を制御することを明らかにした。【結論】これらの結果は、間葉系前駆細胞に発現するARによって制御されるIGF1を介して、骨格筋量を調節していることを示唆している。

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開催年月日： 2024年3月

記述言語：日本語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：札幌   国名：日本国  

アンドロゲンは、核内受容体であるアンドロゲン受容体 (androgen receptor, AR) と結合し、転写因子として働くことで、そのほとんどの機能を発揮する。しかしながら、定常状態の骨格筋組織維持に必須である間葉系前駆細胞におけるARを介する機能については、明らかにできていない。本研究の目的は、骨格筋間葉系前駆細胞でのアンドロゲン標的遺伝子を同定し、その機能から骨格筋組織でのアンドロゲン作用の分子メカニズムを明らかにすることである。間葉系前駆細胞特異的にARを欠損させる遺伝子改変マウスを作成し、RNA-seqならびにCUT&RUNにより、ARの機能ならびにその標的遺伝子を探索した。間葉系前駆細胞特異的AR欠損オスマウスにおいて、四肢の筋肉量が減少することを見出した。さらにRNA-seqの結果から、間葉系前駆細胞におけるARの欠損は、アポトーシスとタンパク質分解に関連する転写産物の異常制御を引き起こすことを見出した。加えて、CUT&RUNの結果から、間葉系前駆細胞におけるARは、インスリン様成長因子1の発現を制御することを明らかにした。これらの結果は、間葉系前駆細胞に発現するARによって制御されるIGF1を介して、骨格筋量を調節していることを示唆している。

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開催年月日： 2024年2月

記述言語：日本語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：東京   国名：日本国  

Androgens exert their effects primarily by binding to the androgen receptor (AR), a ligand-dependent nuclear receptor. While androgens have anabolic effects on skeletal muscle, previous studies reported that AR functions in myofibers to regulate skeletal muscle quality, rather than skeletal muscle mass. Therefore, the anabolic effects of androgens are exerted via extra-myofiber cells or tissues. In this context, the cellular and molecular mechanisms of AR in mesenchymal progenitors, which play a crucial role in maintaining skeletal muscle homeostasis, remain largely unknown. In this study, we demonstrated expression of AR in mesenchymal progenitors and found that targeted AR ablation in mesenchymal progenitors reduced limb muscle mass in mature adult, but not young or aged, male mice, although fatty infiltration of muscle was not affected. The absence of AR in mesenchymal progenitors led to remarkable perineal muscle hypotrophy, regardless of age, due to abnormal regulation of transcripts associated with apoptosis and proteolysis. Additionally, we revealed that AR in mesenchymal progenitors regulates the expression of insulin-like growth factor 1, which can increase skeletal muscle mass in a paracrine manner. These findings indicate that the anabolic effects of androgens indirectly regulate skeletal muscle mass via, at least in part, AR signaling in mesenchymal progenitors.

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開催年月日： 2023年9月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：愛媛   国名：日本国  

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開催年月日： 2023年8月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：大阪   国名：日本国  

我が国をはじめ、先進諸国では高齢化が進行し、今後、更に高齢化率が進むと推測されている。高齢者における生活の質が著しく低下する原因の一つは、サルコペニア（加齢性筋肉減少症）を含む、骨格筋量ならびに筋力の低下である。そのため、正常な筋量・筋力を維持することは、健康寿命延伸にとって極めて重要である。男性ホルモン（アンドロゲン）の投与は筋力を増強させ、筋萎縮の治療法となり得る。しかしながら、心血管イベントとそれに関連する突然死が、深刻な副作用として報告されている。そのため、アンドロゲン補充療法を実現化させるためには、アンドロゲンの骨格筋への作用と心血管への作用を切り離す必要がある。 アンドロゲンは、核内受容体であるアンドロゲン受容体（androgen receptor, AR）と結合し、転写因子としてその機能を発揮する。我々は、骨格筋におけるARのゲノム結合領域を網羅的に同定した。また、これまで発表してきたRNA-seqデータを再解析し、同定されたARの標的候補遺伝子のうち、アンドロゲン依存的かつ骨格筋細胞のAR依存的に、発現が制御される遺伝子を探索した。さらに、シングルセルRNA-seqデータを再解析することで、骨格筋細胞に特異的に発現し、心筋細胞には発現していないAR標的候補遺伝子を同定した。この候補遺伝子の発現を制御することは、アンドロゲンの心血管イベントへの副作用を回避し、骨格筋特異的に作用を及ぼす新たな創薬のターゲットとなり得る。

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開催年月日： 2023年8月

記述言語：日本語  

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開催年月日： 2023年3月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：湘南   国名：日本国  

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開催年月日： 2023年2月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：Online  

Androgens exert their effects primarily by binding to the androgen receptor (AR), a ligand-dependent nuclear receptor. While androgens have anabolic effects on skeletal muscle, previous studies reported that AR functions in myofibers to regulate skeletal muscle quality, rather than skeletal muscle mass. Therefore, the anabolic effects of androgens are exerted via extra-myofiber cells or tissues. In this context, the cellular and molecular mechanisms of AR in mesenchymal progenitors, which play a crucial role in maintaining skeletal muscle homeostasis, remain largely unknown. In this study, we demonstrated expression of AR in mesenchymal progenitors and found that targeted AR ablation in mesenchymal progenitors reduced limb muscle mass in mature adult, but not young or aged, male mice, although fatty infiltration of muscle was not affected. The absence of AR in mesenchymal progenitors led to remarkable perineal muscle hypotrophy, regardless of age, due to abnormal regulation of transcripts associated with apoptosis and proteolysis. Additionally, we revealed that AR in mesenchymal progenitors regulates the expression of insulin-like growth factor 1, which can increase skeletal muscle mass in a paracrine manner. These findings indicate that the anabolic effects of androgens indirectly regulate skeletal muscle mass via, at least in part, AR signaling in mesenchymal progenitors.

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開催年月日： 2022年9月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：松山   国名：日本国  

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開催年月日： 2022年8月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：東京   国名：日本国  

男性ホルモン(アンドロゲン)の投与によって、骨格筋が肥大することは良く知ら れているが、アンドロゲンの骨格筋に対する分子生物学的作用機序は、ほとんど解 明されていない。本研究の目的は、間葉系前駆細胞特異的に、アンドロゲン受容 体を欠損させたマウスを作出し、その表現型を解析することで、骨格筋組織でのア ンドロゲン作用の分子メカニズムを明らかにすることである。間葉系前駆細胞特異 的にタモキシフェン誘導型のCreを発現するマウス(PDGFRα-CreER)と、AR flox マウス(ARL2/+)との交配により、 間葉系前駆細胞特異的AR欠損マウス(PDGFRα -CreER; ARL2/+)を作出した。コントロールマウスと比較して、変異マウスでは、筋 力の低下が見られた。また、種々の骨格筋(上腕二頭筋、前脛骨筋、腓腹筋、ヒラメ 筋)では、筋重量において減少傾向にあった。骨格筋間葉系前駆細胞に発現するARは、 その発現ならびに標的遺伝子を通して、骨格筋量あるいは筋力を制御している可能 性がある。

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開催年月日： 2022年2月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：Online  

Androgens are biologically active compounds that bind to androgen receptors (AR) to mediate various effects, including muscle growth. While it's known that AR activation enhances muscle strength, the specific roles of AR in muscle cells remain unclear. My research aims to determine which cells in skeletal muscle are targeted by androgens/AR and how AR regulates their functions. Skeletal muscle is primarily composed of muscle cells, but also includes satellite cells (muscle stem cells) and mesenchymal progenitors, both of which express AR. In previous studies, I found that inactivating AR in satellite cells does not affect muscle regeneration, suggesting that AR is not essential for this process. However, AR in muscle cells increases muscle strength by upregulating the Mylk4 gene. My current project focuses on mesenchymal progenitors, which also express AR. I have developed AR knockout mice to investigate how AR inactivation affects muscle function and gene regulation across muscle cells, satellite cells, and mesenchymal progenitors. This research aims to uncover new insights into AR's role in muscle biology.

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開催年月日： 2022年

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開催年月日： 2022年

会議種別：ポスター発表  

開催地：東京   国名：日本国  

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開催年月日： 2021年12月

記述言語：日本語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：京都   国名：日本国  

DNA methylation is an essential form of epigenetic regulation responsible for cellular identity. In muscle satellite cells, DNA methylation patterns are tightly regulated during differentiation. However, it is unclear how these DNA methylation patterns are maintained. We demonstrate that ubiquitin like with PHD and RING finger domains 1 (Uhrf1) is activated in proliferating myogenic cells. Ablation of Uhrf1 in satellite cells impairs their proliferation and differentiation, leading to failed muscle regeneration. Uhrf1-deficient satellite cells exhibited dramatic changes in genome-wide DNA methylation profiles and transcript levels. These findings point to Uhrf1 as a regulator of self-renewal and differentiation of satellite cells via genome-wide DNA methylation patterning.

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開催年月日： 2021年9月

記述言語：日本語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：オンライン  

【背景】男性ホルモン（アンドロゲン）の投与によって、骨格筋が肥大することは良く知られているが、アンドロゲンの骨格筋に対する分子生物学的作用機序は、ほとんど解明されていない。【目的】本研究の目的は、間葉系前駆細胞特異的に、アンドロゲン受容体を欠損させたマウスを作出し、その表現型を解析することで、骨格筋組織でのアンドロゲン作用の分子メカニズムを明らかにすることである。【方法】間葉系前駆細胞特異的にタモキシフェン誘導型のCreを発現するマウス（<I>PDGFRα-CreER</I>）と、AR floxマウス（<I>AR<SUP>L2/+</SUP></I>）との交配により、間葉系前駆細胞特異的AR欠損マウス（<I>PDGFRα-CreER; AR<SUP>L2/+</SUP></I>）を作出した。【結果】コントロールマウスと比較して、変異マウスでは、筋力の低下が見られた。また、種々の骨格筋（上腕二頭筋、前脛骨筋、腓腹筋、ヒラメ筋）では、筋重量において減少傾向にあった。【考察】骨格筋間葉系前駆細胞に発現するARは、その発現ならびに標的遺伝子を通して、骨格筋量あるいは筋力を制御している可能性がある。【結論】AR陽性の骨格筋間葉系前駆細胞は、骨格筋制御に関与している。

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開催年月日： 2021年9月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2021年7月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2021年3月

記述言語：英語  

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開催年月日： 2021年3月

記述言語：日本語   会議種別：口頭発表（一般）  

DNA methylation is an essential form of epigenetic regulation responsible for cellular identity. In muscle satellite cells, DNA methylation patterns are tightly regulated during differentiation. However, it is unclear how these DNA methylation patterns are maintained. We demonstrate that ubiquitin like with PHD and RING finger domains 1 (Uhrf1) is activated in proliferating myogenic cells. Ablation of Uhrf1 in satellite cells impairs their proliferation and differentiation, leading to failed muscle regeneration. Uhrf1-deficient satellite cells exhibited dramatic changes in genome-wide DNA methylation profiles and transcript levels. These findings point to Uhrf1 as a regulator of self-renewal and differentiation of satellite cells via genome-wide DNA methylation patterning.

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開催年月日： 2020年12月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

国名：日本国  

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開催年月日： 2019年10月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

国名：日本国  

アンドロゲンの骨格筋に対するアナボリック効果は、アンドロゲン受容体(AR)を介して調整されていると考えられている。しかし、驚くべきことに、実際にヒトに投与されているのにもかかわらず、アンドロゲンの骨格筋に対する分子生物学的作用機序は、ほとんど解明されていない。我々は、ARが骨格筋幹細胞に発現していることを見出した。そこで、骨格筋幹細胞のARが骨格筋再生に必要かを確かめるため、骨格筋幹細胞特異的にARをノックアウトできるマウス（Pax7CE/+;ARL2/YあるいはPax7CreERT2/+;ARL2/Y;R26tdTomato/+）を作出した。驚くべきことに、Pax7CE/+;ARL2/Yマウスと同様に、コントロールマウスであるPax7CE/+マウスにおいても、骨格筋再生時にPax7の発現細胞数が減少した。一方、Pax7CreERT2/+;ARL2/Y;R26tdTomato/+マウスでは、コントロールマウスとミュータントマウスにおいて、骨格筋再生時におけるPax7陽性細胞数に差は見られなかった。以上の結果は、Pax7CE/+マウスは骨格筋幹細胞に表現系を有するため、Pax7CE/+マウスをもちいて適切にコントロールを取るべきであることを示唆する。また、骨格筋幹細胞のARは、再生に寄与していない可能性がある。

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開催年月日： 2019年9月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2019年8月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2019年8月

記述言語：日本語  

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開催年月日： 2019年3月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2018年11月

会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2018年11月

会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：大阪  

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開催年月日： 2018年8月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2017年1月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Chantilly-Gouvieux   国名：フランス共和国  

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開催年月日： 2016年5月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Paris   国名：フランス共和国  

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開催年月日： 2016年3月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Lyon   国名：フランス共和国  

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開催年月日： 2016年2月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Chantilly-Gouvieux   国名：フランス共和国  

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開催年月日： 2015年1月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：Belle-Eglise   国名：フランス共和国  

Cell therapies for treating myopathic diseases with healthy donor cells have been proposed. Although satellite cells, which are mononuclear skeletal muscle stem cells and have the ability to self-renew and form new muscle fibers, are strong candidates for cell therapy as determined by studies with mice, human satellite cells are considerably less well understood. To qualify and expand mouse and human satellite cells, we transplanted them into the muscle of immunodeficient Pax7DTR/+:Rag2–/–:C–/– mice [1], in which endogenous mouse Pax7+ satellite cells can be depleted by the injection of diphtheria toxin. Upon transplantation, human satellite cells contribute to new muscle formation in vivo as assessed by the presence of human lamin A/C integrated in the host mouse muscle fibers. We are currently testing whether they could occupy the satellite cell niche in vivo, expand in the niche, and be re-isolated from host muscle to assess whether human satellite cells have self-renewal properties in mouse, and to what extent the mouse and human niches are compatible.

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開催年月日： 2014年5月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

国名：イタリア共和国  

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開催年月日： 2014年4月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Paris   国名：フランス共和国  

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開催年月日： 2014年2月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Belle-Eglise   国名：フランス共和国  

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開催年月日： 2012年9月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

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開催年月日： 2012年6月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

国名：日本国  

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開催年月日： 2011年12月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：横浜   国名：日本国  

[Purpose] Duchenne muscular dystrophy (DMD) is caused by the mutations of the gene encoding dystrophin. Although various skeletal muscle stem cells or progenitors are used to treat DMD, these cells exhibit poor capacity for the engraftment into regenerating muscle. Exploring muscle stem cells suitable for cell therapy, we examined capability of Pax3-positive embryonic and fetal myogenic progenitors (EMPs and FMPs) at different stages for the engraftment to skeletal muscle of DMD model mice. [Materials and Methods] Using a mouse strain with the GFP reporter gene targeted into Pax3, we developed cell-sorting method for isolating EMPs and FMPs. [Results] We isolated Pax3-GFP cells from embryos at E10.5 and from those at E16.5. While quantitative PCR showed that isolated Pax3-GFP cells at embryonic stage E10.5 (EMPs) contained neural crest cells, Pax3-GFP cells at fetal stage E16.5 (FMPs) had few neural crest cells. When plated on dishes after sorting GFP positive cells, the FMPs activated the myogenic program as demonstrated by sequential expression of myogenic regulatory factors, while the EMPs failed to grow under the same condition. Intramuscular transplantation of FMPs into dystrophic mice resulted in efficient engraftment of adult myofibers with restoration of dystrophin without formation of tumors, whereas mice that received EMPs presented no dystrophin positive myofibers. [Conclusion] The data here demonstrate that Pax3(+) FMPs have a high therapeuitc potential in muscular dystrophy. Understanding the cellular and molecular mechanisms underlying efficient transplantation of these MPs would help development of cell therapies for skeletal muscle degeneration diseases.

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開催年月日： 2011年11月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Kobe   国名：日本国  

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開催年月日： 2011年9月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Awaji   国名：日本国  

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開催年月日： 2010年11月

記述言語：英語   会議種別：口頭発表（一般）  

開催地：Awaji   国名：日本国  

Purpose/Background: Duchenne and other types of muscular dystrophies are caused by the loss or mutations of the genes encoding the dystrophin protein complex. These muscle disorders still need effective treatments, and induced pluripotent stem (iPS) cells may constitute an attractive cell therapy because they are pluripotent and can be generated from adult tissues. Little progress has been made toward the use of iPS cells to isolate skeletal muscle progenitors. The goal of this work is the establishment of an effective method to generate myogenic progenitors from mouse iPS cells that can be applicable in the amelioration of muscular dystrophy in future. Methods/Approaches: In embryogenesis, all skeletal muscles except for those of the head are derived from the somite. The somite forms the dermomyotome, which gives rise to muscle. Cells expressing the transcription factor Pax3 in the dermomyotome migrate to form myotome. I have used a Pax3GFP/+ mice line to directly isolate Pax3-GFP-expressing dermomyotome cells by flow cytometry from embryos as platelet-derived growth factor receptor-α (PDGFR-α) positive cells. And I generated iPS cells from Pax3GFP/+ mice with Oct3/4, Klf-4 and Sox2. Results/Perspectives: Immunohistochemistry of Pax3GFP/+ embryos indicate that dermomyotome was positive for (Pax3)GFP and PDGFR-α. I sorted (Pax3)GFP+PDGFR-α+ cells from Pax3GFP/+ mice embryos. These cells were also positive for the dermomyotome markers En1 and Sim1, the myogenic markers Myf5 and Myogenin by RT-PCR. Pax3GFP/+ mice-derived iPS cells gave rise to teratoma containing tissues that partially expressed (Pax3)GFP. This iPS clone was differentiated as embryoid bodies. After 12 days induction, (Pax3)GFP+PDGFR-α+ cells was observed by FACS analysis. The in vivo muscle regeneration potential of these double positive cells will be evaluated by transplanting these cells into DMD mice which is the model mice of Duchenne types of muscular dystrophies.

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開催年月日： 2009年11月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：Awaji   国名：日本国  

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開催年月日： 2009年1月 - 2009年2月

記述言語：英語   会議種別：ポスター発表  

開催地：京都   国名：日本国  

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